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氨基酸分析儀檢測(cè)氨基酸制成品酸水解氨基酸

發(fā)布時(shí)間: 2024-09-12 17:13 來(lái)源: 大昌華嘉科學(xué)儀器
領(lǐng)域: 其他
樣品:氨基酸分析儀檢測(cè)氨基酸制成品酸水解氨基酸項(xiàng)目:氨基酸分析儀檢測(cè)氨基酸制成品酸水解氨基酸
參考:https://www.dksh-instrument.cn/Solution/597


本品為未知含量及種類的氨基酸不同制成品,01樣為粉末狀,02樣為棉絮狀。使用Biochrom30+全自動(dòng)氨基酸分析儀,對(duì)其所含的氨基酸組分及含量進(jìn)行分析。結(jié)果表明該未知樣中氨基酸各單個(gè)氨基酸含量的濃度見附頁(yè)結(jié)果表。其中樣01氨基酸總含量為14.567 umol/mL,02氨基酸總含量為31.124 umol/mL。



一、樣品前處理

1、所用試劑

1.1 Loading Buffer:鈉鹽系統(tǒng),pH 2.2

1.2 濃鹽酸,濃度≥36%,優(yōu)級(jí)純

1.3 6mol/L 鹽酸:取500mL 鹽酸加水稀釋至1000mL,混勻

1.4 水:去離子水

1.5 17種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品



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2、前處理設(shè)備

1)分析天平:精度為 0.0001g

2)移液槍及槍頭

3)一次性注射器及0.22um濾膜

4)低范圍pH試紙

5)真空干燥烘箱

6)無(wú)油真空泵

7)電熱平板及稱量瓶


3、樣品制備(參考GB 5009.124-2016食品中氨基酸的測(cè)定)

移液槍準(zhǔn)確移取試樣1mL,加入水解管中,加入10mL 6mol/L鹽酸(1.3),冷凍3min?5min,接到真空泵的抽氣管上,抽真空(接近0Pa),然后充入氮?dú)?重復(fù)抽真空-充入氮?dú)獠襟E3次后,在充氮?dú)鉅顟B(tài)下擰緊螺蓋。將水解管放入真空干燥箱中,110°C水解22-24h,冷卻、混勻、開管、轉(zhuǎn)移并定容到50ml容量瓶中,用移液槍取適量水解液于稱量瓶中,在電熱平板上60℃濃縮至干,必要時(shí)加入少許水(1.4),重復(fù)蒸干1-2次,加入適量PH2.2的稀釋上機(jī)用檸檬酸鈉緩沖液溶解(1.1),振蕩混勻后,吸取溶液通過0.22 μm 濾膜后,轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶,為樣品測(cè)定液,供儀器測(cè)定用。


二、分析方法描述(Biochrom 30+)

氨基酸分析儀分析方法參數(shù):

1)色譜柱:Biochrom Na型陽(yáng)離子交換樹脂柱,4.6x20cm

2)分離程序:

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運(yùn)行時(shí)間:經(jīng)分析時(shí)間+再生時(shí)間 60.15min


3)反應(yīng)單元溫度:135°C

4)檢測(cè)波長(zhǎng):570nm、440nm同時(shí)檢測(cè)


三、樣品中氨基酸含量的計(jì)算

樣品測(cè)定液氨基酸的含量按式(1)計(jì)算:

Ci = Cs/As × Ai× F ··················· (1)式中:

Ci — 樣品測(cè)定液氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

Cs — 氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

Ai — 試樣測(cè)定液氨基酸i的峰面積;

As — 氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的峰面積;

F — 樣品稀釋倍數(shù)。


附、氨基酸制成品中的酸水解氨基酸其分析圖譜及做樣結(jié)果:

圖1.  樣品01

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圖2.  樣品02

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