western blot 在加熒光劑后，顯影定影的時間及具體操作
如果免疫反應好，加熒光劑后在暗室里，可以看到很亮的條帶。有時候，條帶發光可以有半個小時之久。
所以在加熒光劑后，反應大概一到四分鐘。小心把膜放到暗盒里，放好后再也不要移動膜，否則熒光會消失。膜上覆蓋一張保鮮膜，小心，鋪展。將準備好的膠片放在膜上，放上去后也不要再移動了。然后壓片。
可以依據最初看到的熒光亮度大概判定壓片時間。一般可以看到明顯的熒光條帶，先壓三十秒。顯影時，要把膠片完全浸入顯影液，可以用透明的或者白色的盒子，可以看到顯影，當看到膠片上有黑色條帶，基本上顯影可以了。多放個幾秒鐘，可以撈出來了，過下清水，放定影液里就可以了。
如果你覺得顯影的條帶過濃，就再重新壓一張，時間短一點。條帶淺，就壓時間長點。
如果加熒光劑后并沒有直接看到條帶，也可以壓片，這時候可能要壓蠻久的。我有試過壓片兩個小時，或者過夜，但是結果基本不能用。
還有，顯影液最好不要重復用，且用過的不要倒回原液。我用的進口的顯影液，結果為了節省，用后回收，幾次之后一整瓶都壞掉了。定影液可以反復用，但是最好倒出后就不要再倒回去了。
wb是一個漫長而艱辛又枯燥的實驗過程。
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