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戊巴比妥鈉和異氟烷對大鼠急性應激反應的影響(二)

2020.6.02

3. 結果

3.1 血漿激素水平

FSD組血漿激素明顯升高(P<0.001),但是和CTRD組相比T檢驗(P=0.834)或E2 levels(P=0.248)無顯著差異。?????
類似結果被觀察到,當FSI組和CTRI組相比較,血漿CORT水平顯著升高(P<0.001)。血漿T(P=1.000)和E2 Levels(P=0.563)沒有出現明顯的變化。相比之下,FSP集團并未顯示血漿CORT顯著變化(P = 0.132),T(P = 0.848),或E2水平(P = 0.949)與CTRP組比較(圖1)。此外,兩CTRP(P = 0.008)和點擊率(P = 0.004)組明顯高于血漿CORT水平比CTRD組,而綜合技術研究血漿CORT水平(P = 0.248)與CTRD組比較未顯示出有顯著差異(圖1)。

2015825165828197.jpg
圖1


3.2 下丘腦和額葉相關分子表達

在電擊FS刺激處死大鼠實驗無任何組在下丘腦CRH,AVP mRNA表達和催產素或額葉NR2B,GABAAR,和nnachr有顯著性差異(圖2)。

201582516571939.jpg

圖2


4. 討論

目前研究表明,斷頭前腹腔注射戊巴比妥顯著增加基礎血漿CORT水平,這可能會影響研究結果。另一方面,斷頭前異氟烷吸入麻醉不影響基礎血漿CORT水平。事實上,生理鹽水腹腔注射對照組增加基礎血漿CORT水平,表明是腹腔注射而不是戊巴比妥造成額外的刺激。我們還發現,麻藥的使用,即腹腔注射戊巴比妥和吸入異氟烷,電擊FS 30min后不干擾測量腦應激相關mRNA分子表達。

我們發現,FS后直接斷頭處死大鼠或吸入異氟烷后斷頭處死大鼠顯著增加血漿CORT水平,這與之前的研究是一致的[ 12 ]。然而,由于在非FS組皮質醇水平升高,這種應激反應在腹腔注射戊巴比妥鈉注射液組沒有出現。由于腹腔注射戊巴比妥鈉和腹腔注射生理鹽水造成的對照組血漿CORT相似的增長,而額外增加血漿CORT水平在異氟烷組或直接斷頭對照組未出現,額外的應激明確是來自注射本身,而不是對戊巴比妥鈉化合物的效果,混淆了結果。應該指出的是,FS電擊雄性SD大鼠20min后我們沒有觀察到血漿中T、E2水平或下丘腦CRH,AVP和oxtmrna水平或在額葉皮層NR2B, nnachr GABAA受體mRNA的表達顯著差異。在某些區域的某些相關分子的表達可能沒有回應,直到30分鐘或更多的雄性SD大鼠的應激后。在下丘腦PVN CRH mRNA開始明顯增加,2 h和1 h的AVP mRNA開始增加約束應力[ 13 ]出現,雖然2小時固定[ 14 ]后OXT mRNA沒有顯示變化,可4小時腹腔注射高滲鹽水后顯著增加[ 15 ]。這些數據可以解釋在我們的研究中觀察到的與應激有關的分子改變mRNA的表達。應當指出,然而,那其他一些分子mRNA的表達,如黑皮質素受體亞型4(MC4R)和阿黑皮素原,表明雄性SD大鼠下丘腦顯著增加,在30分鐘內從一個類似的FS電擊刺激開始,在杏仁核的[ 16 ] CRH mRNA和MC4R基因mRNA表達明顯增加,說明FS引發變化的分子和腦區時相關的。

我們數據表明,電擊30min后,斷頭前麻醉大鼠不影響下丘腦和額葉相關分子血漿激素水平或mRNA的表達,但實施方式可能影響血漿CORT水平,異氟烷吸入后斷頭似乎維持應激反應的完整,而且從倫理學角度也是應激反應研究的最佳選擇。


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