什么是質(zhì)譜及其目的
質(zhì)譜的定義
質(zhì)譜，是一種分析方法，原理就是讓帶電原子、分子或分子碎片按質(zhì)荷比的大小順序排列，打出相應(yīng)的譜線。
待分析的樣品分子在離子源中離化成具有不同質(zhì)量的單電行分子離子和碎片離子，這些單電荷離子在加速電場(chǎng)中獲得相同的動(dòng)能并形成一束離子，進(jìn)入由電場(chǎng)和磁場(chǎng)組成的分析器中；其中離子束中速度較慢的離子通過(guò)電場(chǎng)后編轉(zhuǎn)大，速度快的偏轉(zhuǎn)小；在磁場(chǎng)中離子發(fā)生角速度矢量相反的偏轉(zhuǎn)，即速度慢的離子依然偏轉(zhuǎn)大，速度快的偏轉(zhuǎn)??；當(dāng)兩個(gè)場(chǎng)的偏轉(zhuǎn)作用彼此補(bǔ)償時(shí)，它們的軌道便相交于一點(diǎn)。
與此同時(shí)，在磁場(chǎng)中還能發(fā)生質(zhì)量的分離，這樣就使具有同一質(zhì)荷比而速度不同的離子聚焦在同一點(diǎn)上，不同質(zhì)荷比的離子聚焦在不同的點(diǎn)上，其焦面接近于平面，在此處用檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)即可得到不同質(zhì)荷比的譜線，即質(zhì)譜。
質(zhì)譜的目的
簡(jiǎn)單介紹一下：用質(zhì)譜鑒定蛋白質(zhì)，現(xiàn)在比較常用的有MALDI-TOF或ESI。一般是將目的蛋白用胰酶水解，使其裂解為以堿性氨基酸為C-末端的肽段，然后用質(zhì)譜檢測(cè)組成肽段的分子量，再與已有數(shù)據(jù)庫(kù)中各蛋白質(zhì)譜結(jié)果比對(duì)，從而鑒定蛋白質(zhì)。
因此，質(zhì)譜是一種特征譜，鑒定前提是你的蛋白是已知的。一級(jí)質(zhì)譜不能直接測(cè)出氨基酸的序列。如果是做蛋白表達(dá)，那么應(yīng)該是一種已知蛋白了，可以用質(zhì)譜鑒定。
其實(shí)關(guān)于蛋白質(zhì)質(zhì)譜，有關(guān)參考書(shū)很多，介紹也很詳細(xì)。可以查閱一下。向你推薦《蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)指南》（Proteins and Proteomics: A Laboratory Manual），科學(xué)出版社2003年的，可以說(shuō)是這方面的權(quán)威了。
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