用酸水解法怎么測定脂肪
1．酸水解法原理強酸與樣品一同加熱進行水解，結合或包藏在組織里的脂肪可游離出來，然后用乙醚和石油醚提取脂肪，回收溶劑，除去溶劑后即為脂肪含量。2．儀器①100 mL具塞刻度量筒。②烘箱。3．試劑①95％乙醇。②乙醚(不含過氧化物)。③石油醚(30~60℃沸程)。④濃鹽酸。4．測定步驟①樣品處理a．固體樣品：準確稱取約2．0 g，置于50 mL試管中，加8 mL水，混勻后再加10 mL濃鹽酸。b．液體樣品：準確稱取10.0 g置于50mL試管中，加10 mL，濃鹽酸。②水解：將試管放入70~80℃水浴中，每隔5～10 min用玻璃棒攪拌一次，至樣品脂肪游離消化完全為止，時間約需40~50 rain。水解過程中，如水分蒸發，應適當補加水，保持溶液總體積不變，以避免酸濃度升高。③提取：取出試管，加入10 mL乙醇，混合。冷卻后將混合物移人100 mL具塞量筒中，用25 mL乙醚分次洗試管，洗液一并倒人量筒中。加塞振搖1 rain，小心開塞放出氣體，再塞好，靜置12 min，小心開塞，用石油醚一乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。靜置10~20min，待上部液體澄清，吸出上清液于已恒重的燒瓶內，再加5 mL石油醚一乙醚等量混合液于具塞量筒內，振搖，靜置后，仍將上層乙醚吸出，放人原燒瓶內。④回收溶劑、烘干、稱重：回收燒瓶內乙醚后，將燒瓶于水浴上蒸干后，置100~105℃烘箱中干燥2 h，取出放進干燥器內，冷卻30 min后稱重，反復干燥冷卻操作至恒重。5.說明
①測定的樣品需充分磨細，液體樣品需充分混合均勻，以使消化完全。
②水解后加的乙醇可使蛋白質沉淀，促進脂肪球聚合，同時溶解一些碳水化合物、有機酸等。后面用乙醚提取，因乙醇可溶于乙醚，故需加入石油醚，降低乙醇在醚中的溶解度，使乙醇溶解物殘留在水層，并使分層清晰。
③揮干溶劑后，殘留物中若有黑色焦油狀雜質，是分解物與水一同混入所致，會使測定值增大，造成誤差，可用等量的乙醚及石油醚溶解后過濾，再次進行揮干溶劑的操作。
④因磷脂在酸水解條件下分解為脂肪酸和堿，故本法不宜用于測定含有大量磷脂的食品如魚類、貝類和蛋品。此法也不適于含糖高的食品，因糖類遇強酸易碳化而影響測定結果。詳情請參考國家標準物質網
