出口食品中霍亂弧菌檢驗方法！
出口食品中霍亂弧菌檢驗方法！
一、培養(yǎng)基明細(xì)：
名稱 規(guī)格 價格（元）
堿性蛋白胨水（APW） 250g 70
TCBS瓊脂 250g 95
三糖鐵瓊脂（TSI） 250g 85
雙糖鐵瓊脂（KIA） 250g 85
T1N1瓊脂 250g 85
精氨酸葡萄糖斜面瓊脂（AGS） 100g 385
Hugh-Leifson葡萄糖肉湯（HLGB） * *
MR-VP肉湯 20支 15
ONPG胨水 20支 35
Andrade氏糖類肉湯 250g 80
Andrade氏指示劑 100ml 50
氧化酶試劑 1g 50
粘絲試驗溶液 * *
革蘭氏染色液 5ml*8 40
5%紅細(xì)胞生理鹽水 * *
50萬單位多黏菌素B紙片 * *
10ug和150ugO/129紙片 * *
霍亂弧菌診斷血清（O1群） 1ml*12 480
霍亂弧菌診斷血清（O139群） 1ml 50
二、備注：
1、依據(jù)SN/T 1022—2001出口食品中霍亂弧菌檢驗方法 適用于出口水產(chǎn)品及其它食品的檢驗。
2、術(shù)語：
霍亂弧菌：為革蘭氏陰性菌，菌體彎曲呈弧狀或逗點狀，菌體一端有單根鞭毛和菌毛，無莢膜與芽胞。經(jīng)人工培養(yǎng)后，易失去弧形而呈桿狀。細(xì)菌運動極為活潑，呈流星穿梭運動。營養(yǎng)要求不高，在PH8.8～9.0的堿性蛋白胨水或平板中生長良好。因其他細(xì)菌在這一PH不易生長，故堿性蛋白胨水可作為選擇性增殖霍亂弧菌的培養(yǎng)基。在堿性平板上菌落直徑為2mm,圓形，光滑，透明。
霍亂弧菌能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，靛基質(zhì)反應(yīng)陽性，當(dāng)培養(yǎng)在含硝酸鹽及色氨酸的培養(yǎng)基中，產(chǎn)生靛基質(zhì)與亞硝酸鹽，在濃硫酸存在時，生成紅色，稱為霍亂紅反應(yīng)，但其他非致病性弧菌亦有此反應(yīng)，故不能憑此鑒定霍亂弧菌。EL Tor型霍亂弧菌與古典型霍亂弧菌生化反應(yīng)有所不同。前者Vp陽性而后者為陰性。前者能產(chǎn)生強烈的溶血素，溶解羊紅細(xì)胞，在血平板上生長的菌落周圍出現(xiàn)明顯的透明溶血環(huán)，古典型霍亂弧菌則不溶解羊紅細(xì)胞。個別EL Tor型霍亂弧菌株亦不溶血。根據(jù)弧菌O抗原不同，分成Ⅵ個血清群，第Ⅰ群包括霍亂弧菌的兩個生物型。第Ⅰ群A、B、C三種抗原成份可將霍亂弧菌分為三個血清型：含AC者為原型（又稱稻葉型），含AB者為異型（又稱小川型），A、B、C均有者稱中間型（彥島型）。霍亂弧菌對熱，干燥，日光，化學(xué)消毒劑和酸均很敏感，耐低溫，耐堿。濕熱55℃，15分鐘，100℃，1～2分鐘，水中加0.5ppm氯15分鐘可被殺死。0.1%高錳酸鉀浸泡蔬菜、水果可達(dá)到消毒目的。在正常胃酸中僅生存4分鐘。
3、粘絲試驗溶液：溶解0.5g去氧膽酸鈉于100ml水中，擰緊瓶蓋保存于冰箱中，無需高壓滅菌。霍亂弧菌在鈣溶液中被乳化后，1min內(nèi)形成粘液狀團塊。當(dāng)粘塊從玻片上被拉出2cm—3cm時呈粘絲。
4、Hugh-Leifson葡萄糖肉湯（HLGB）：
配方：
蛋白胨 2.0g
酵母浸粉 0.5g
氯化鈉 30.0g
葡萄糖 10.0g
溴甲酚紫 0.015g
瓊脂 3.0g
蒸餾水 1000ml
制法：將各成分（溴甲酚紫除外）加入蒸餾水中，充分混勻，攪拌加熱溶解調(diào)節(jié)pH7.4，加入溴甲酚紫，混勻，分裝于15mm*150mm試管的1/3容量，121℃高壓滅菌15min。接種后覆蓋約1ml滅菌礦物油以檢查葡萄糖發(fā)酵。
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