水中細菌總數如何測定
目前,世界各國對于控制飲用水的衛生質量,常采用細菌總數這個指標。我國《生活飲用水衛生標準》(GB5749—2006)中規定生活飲用細菌總數每毫升不得超過100個。
(1)細菌總數的測試方法采用標準平皿法對水樣中的細菌作計數,這是一種測定水中好氧、兼性厭氧的異養細菌密度的方法。由于細菌在水體中能以單獨個體、成對、鏈狀或成團的形式存在,此外沒有單獨的一種培養基等要求,所以該法得到的菌落數實際上要低于被測水樣中真正存在的活細菌的數目。
細菌總數是指1mL水樣在營養瓊脂培養基中,于37℃經24h培養后所生長的細菌菌落的總數。
(2)檢驗步驟在無菌操作條件下,用滅菌移液管吸取1mL充分混勻的水樣(水樣視污染情況作適當稀釋)注入滅菌培養皿中接著再注入約15mL已融化又冷卻至45℃左右的培養基,立即旋搖平皿,使水樣與培養基充分混合。每一水樣做兩個平行。另用一只滅菌的培養皿,傾注普通培養基15mL,作空白對照。待培養基凝固后,放入37℃培養箱中倒置培養24h后進行菌落計數。
(3)結果分析平皿菌數的計算,可用肉眼觀察,必要時用放大鏡檢查以免遺漏,也可借助于菌落計數器計數。記下各培養皿的菌落數后,求出同一稀釋比的平均菌落數。兩個平皿中菌落數的平均數乘以稀釋倍數,即得1mL水樣中的細菌總數。
在計算菌落數時,有較大片狀菌落生長的平皿不能采用,而應以無片狀菌落的平皿進行菌落計數。若片狀菌落不到培養皿的一半而其余一半菌落分布又很均勻則可以半皿計,再乘以2代表全培養皿的菌落數。不同情況下的計算方法介紹如下。
①選擇平均菌落數在30~300之間者進行計算。當只有一個稀釋度的平均菌落數符合此范圍時,可以此作為平均菌落數乘以稀釋倍數。
②若有兩個稀釋度的平均菌落數均在30~300之間,則應按兩者菌落總數之比值來決定。若其比值小于2,應報告兩者的平均數;若大于2,則報告其中較少的菌落總數。
③若所有稀釋度的平均菌落數均大于2,則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告。
④若所有稀釋度的平均菌落數均小于30,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數報告。
⑤若所有稀釋度的平均菌落數均不在30~300,則應按最接近300或30的平均菌落數乘以稀釋倍數報告。
菌落計算的報告方式,菌落總數在100以內時,報告實有數字;大于100時,采用兩位有效數字計算。若菌落數為“無法計算”時,應注明水樣的稀釋倍數。
通常認為,1mL水中,如果細菌總數為10~100個為極清潔水;100~1000個為清潔水;1000~10000個為不太清潔水;10000~100000不清潔水;多于100000個為極不清潔水。
