ISO/TS 20224-6:2020
分子生物標志物分析食品和飼料中動物源性物質的實時PCR檢測第6部分:馬DNA檢測方法

Molecular biomarker analysis — Detection of animal-derived materials in foodstuffs and feedstuffs by real-time PCR — Part 6: Horse DNA detection method

適用范圍: 本文件規定了實時定量聚合酶鏈反應（real-time PCR）方法，用于從食物和飼料中定性檢測馬屬動物來源的特異性DNA。該方法要求從相關基質中提取足夠量的可用于PCR擴增的DNA，并可應用于 Domestic 馬(Equus caballus)、騾子(Equus caballus ♀ × Equus asinus ♂)、小馬（Equus caballus ♂ × Equus asinus ♀）和雜種斑馬（Equus caballus × Equus simplicidens）來源的馬材料的檢測。該測定還可檢測普氏野馬(Equus przewalskii)和斑馬(Equus burchellii)物種。目標序列是來源于Equus caballus Twilight品種純血統賽馬28號染色體（EquCab3.0，全基因組 shotgun測序）的單拷貝序列（即GenBank登錄號NC_009171.3），其在單倍體基因組中存在一個拷貝。本文件提供的針對該目標的PCR測定具有5個拷貝/反應的絕對檢測限，在此濃度下 replicate 率為≥95% (LOD95%)。

術語	描述
實時定量PCR real-time quantitative PCR	A method for detecting and quantifying DNA in real time using fluorescence markers.
目標序列 target sequence	在實時定量PCR中用于檢測的特異性DNA序列。

實時PCR儀	一種用于執行聚合酶鏈反應并實時監測熒光信號的設備。