DB36/T 1902-2023
實驗動物嗜肺巴斯德桿菌熒光定量PCR檢測方法

Fluorescence quantitative PCR detection method of Pasteurella pneumophila in experimental animals

適用范圍: 本文件規(guī)定了實驗動物嗜肺巴斯德桿菌熒光定量PCR檢測的術語和定義、縮略語、設備和材料、試劑、檢測流程和結果判定等內(nèi)容。本文件適用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔中嗜肺巴斯德桿菌的檢測，飼養(yǎng)環(huán)境中嗜肺巴斯德桿菌的檢測參照執(zhí)行。

術語	描述
嗜肺巴斯德桿菌 Pasteurella pneumotropica	屬于巴斯德菌科，巴斯德菌屬，為革蘭陰性，無動力，無芽孢的小桿菌。主要有兩種生物型，分別是 Jawetz 型和 Heyl 型。
熒光定量聚合酶鏈式反應 real-time quantitative polymerase chain reaction; real-time PCR	在常規(guī) PCR 的基礎上，在反應體系中加入一對特異性引物和一條特異性探針，探針兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR 擴增時，Taq 酶的 5'→3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，淬滅作用消失，熒光信號產(chǎn)生并被檢測儀器接受。隨著 PCR 反應的循環(huán)進行，PCR 產(chǎn)物與熒光信號的增長呈對應關系，通過檢測熒光信號對核酸模板進行檢測。
Ct值 cycle threshold value	熒光定量PCR反應中每個反應管內(nèi)的熒光信號達到設定的閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。

熒光定量 PCR 儀	用于實時檢測PCR擴增過程中熒光信號變化的儀器，能夠記錄每輪循環(huán)的熒光強度變化數(shù)據(jù)，并根據(jù)這些數(shù)據(jù)繪制熒光曲線。
高速冷凍離心機	用于在高溫環(huán)境下快速分離生物分子的技術設備，通常用于DNA提取過程中的沉淀收集和溶液分離。
生物安全柜	用于提供局部操作區(qū)域的無菌環(huán)境，防止有害氣溶膠、塵埃和微生物的擴散，確保實驗室人員的安全。
生物安全柜 MSC-1000IIA2 美的生物醫(yī)療 MSC-1000IIA2 生物安全柜 MSC-1300IIA2 美的生物醫(yī)療 MSC-1300IIA2 生物安全柜 MSC-1600IIA2 美的生物醫(yī)療 MSC-1600IIA2 S@femate EVO A2型生物安全柜 EuroClone S@femate EVO A2