二苯胺法測定DNA含量【實驗目的】?掌握二苯胺法測定DNA含量的原理和方法?【實驗原理】?DNA分子中2-脫氧核糖殘基在酸性溶液中加熱降解,產生2-脫氧核糖并形成ω-羥基-γ-酮基戊酸,后者與二苯胺試劑反應產生藍色化合物,其反應如下圖。藍色化合物在595nm處有最大吸收,且DNA在40μg ~400μg范圍內時,吸光度與DNA濃度成正比。在反應液中加入少量乙醛,可以提高反應靈敏度。...
二苯胺試劑稱取1g 二苯胺, 溶于100mL 的分析純的冰乙酸中,再加入60%以上的過氯酸10mL,混勻待用。臨用前加入1mL 的1.6%乙醛,配好的試劑應為無色。4.分光光度計(三)操作方法1. 制作DNA 標準曲線:取12 支潔凈干燥試管按表1 加入試劑:表1 DNA標準曲線制作按上表加完各試劑后,充分混勻。...
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